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細胞生長曲線的測定

細胞生長曲線的測定

產(chǎn)品型號:

所屬分類:細胞生物學實驗

產(chǎn)品時間:2025-07-20

簡要描述:提供商: 上海研謹生物
服務(wù)名稱: 細胞生長曲線的測定
規(guī)格: 細胞生長曲線的測定
價格: 300元
收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談,我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。
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詳細說明:

細胞生長曲線的測定實驗目的

掌握繪制細胞生長曲線的原理和方法。

細胞生長曲線的測定背景與原理

生長曲線是測定細胞生長數(shù)的常用方法,也是判定細胞活力的重要指標,是培養(yǎng)細胞生物學特性的基本參數(shù)之一。--般細胞傳代之后,經(jīng)過短暫的懸浮后貼壁,隨后渡過長短不同的潛伏期,即進入快速生長的指數(shù)生長期。在細胞達到飽和密度后,停止生長,進入平臺期,然后退化衰亡。為了準確描述整個過程中細胞數(shù)目的動態(tài)變化,需連續(xù)對細胞進行計數(shù)。通常計數(shù)6天。為精確起見,一般每次實驗設(shè)3個平行重復。

[材料、試劑與儀器]

1、實驗材料:

Hela細胞系。

2、實驗試劑:

DMEM培養(yǎng)基(青霉素,鏈霉素,10%血清) ,0.25%胰蛋白酶溶液, 臺酚藍染液。

3、實驗儀器:

超凈工作臺,CO2培養(yǎng)箱,倒置顯微鏡,微量移液器,血細胞計數(shù)板,培養(yǎng)瓶,離心管,移液管,廢液缸,蓋玻片, 24孔板。

[方法與步驟]

1、取生長良好的細胞,用培養(yǎng)基制成細胞懸液后計數(shù)。根據(jù)細胞計數(shù)結(jié)果按5x104/mL作傳代培養(yǎng)接種于24孔板中,共接種21孔細胞。1 m/孔。余下三孔可設(shè)傳代培養(yǎng)的對照。

2、24h后每天記錄細胞數(shù)目,每次取3孔細胞,分別進行計數(shù)。計算平均值。連續(xù)計數(shù)7d。細胞用胰酶消化后加入一定量的培養(yǎng)基,混勻制成細胞懸液。取少量懸液與臺酚藍1:1混臺。取一干凈的血細胞計數(shù)板,蓋上蓋片,從蓋片兩邊滴入細胞懸液使之充滿計數(shù)板和蓋片之間。注意滴液勿有氣泡,也不能太多,否則會使蓋片浮起而使細胞計數(shù)不準。

3、低倍鏡下觀察,活細胞不著色,臺盼藍著色的細胞呈深藍色,是不健康或已死亡的細胞,不能計數(shù)。

找出計數(shù)板上的方格,計算四角大格內(nèi)總細胞數(shù),大格線者只計左側(cè)和上方,不計右側(cè)和下方細胞懸液中細胞

密度計算公式為:細胞數(shù)/mL= (四角大格內(nèi)細胞數(shù)/4) x104x2

4、根據(jù)細胞計數(shù)結(jié)果,以單位細胞數(shù)(細胞數(shù)/mL)為縱坐標,以時間為橫坐標繪制生長曲線。

 

實驗代做服務(wù):

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務(wù)

流式細胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

細胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實驗

microRNA測序

動物實驗

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實驗

 

免疫共沉淀

真核表達載體構(gòu)建

染色質(zhì)免疫沉淀CHIP

非標定量(Label-free)實驗



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